产品货号:
KL2210182
中文名称:
植物油RNA纯化试剂盒(沉淀法)
英文名称:
Plant Oil RNA Purification Kit
产品规格:
5T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于从植物油中提取RNA的试剂盒。由于精制食用植物油生产过程中有高温高压过程,因此RNA破坏严重。同时RNA在植物油中的溶解度非常小,因此残留RNA浓度非常低,一般在0.1~0.5pg/mL范围,要提取到这些痕量的RNA非常困难。为了解决这一难题,专门开发出了本制品。

- 本试剂盒足够5次植物油RNA提取,每次50mL植物油,如果按0.1~0.5pg/mL的浓度,可提出约5~25pg的植物油RNA。
- 本制品纯化得到的植物油RNA为痕量,不能测OD(低于检测极限),只能用RT-PCR检测。
- 沉淀法,RNA回收率高达90%。
- 适用于各种植物油,如大豆油、菜籽油、葵花籽油及各种调和油,所得RNA可以用于×g基因检测。
- 操作简单,提取过程一般只需要30分钟。
- 本制品只能用于科研。

| 组分 | 规格 |
| 植物油RNA纯化溶液A | 250mL |
| 植物油RNA纯化溶液B | 500μL |
| 植物油RNA纯化溶液C | 250mL |
| RNA提取剂 | 250mL |
| 微量核酸沉淀剂 | 250mL×2 |
| RNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,溶液B长期保存需置于-20℃,有效期1年。

异丙醇、75%乙醇。

- 在一个250mL的塑料烧杯或塑料三角瓶中,加入50mL植物油样品、50mL植物油RNA纯化溶液A和100μL植物油RNA纯化溶液B,磁力搅拌2~4小时。只能用塑料烧杯,不能用玻璃烧杯,因为玻璃会吸附RNA。
- 加入50mL植物油RNA纯化溶液C,继续磁力搅拌3小时。此时溶液体积为150mL。
- 将150mL混合液平均分到4个50mL离心管中(每管大约37mL),8000×g离心5分钟。管中液体将分为上层的油相和下层的水相(水相大约有12mL)。
- 用移液枪直接取下层水相到新的离心管中,加入等体积的RNA提取剂,震荡混匀。
- 8,000×离心5分钟,管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中,下层有机层和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,最好留下100μL上清液不取。
- 各加入2倍体积的微量核酸沉淀剂(12mL液体需要加24mL微量核酸沉淀剂),颠倒混匀后,12000×g离心30分钟。
- 弃上清液,保留沉淀(含植物油RNA)。
- 再离心1分钟,弃管中残留液体。
- 各用100μL RNA洗脱液溶解沉淀,最后将400μL(每管100μL,共4管)RNA溶液汇集到1各个1.5mL的离心管中。
- 加等体积(400μL)的RNA提取剂,充分震荡3分钟。
- 8000×g离心5分钟,管中液体将分为上层的水相和下层的有机相。小心取水相到一新的离心管中。
- 加入2倍体积(800μL)微量核酸沉淀剂,颠倒10次混匀后,13000×g离心15分钟,小心弃上清。
- 加入自备的75%乙醇,13000×g离心5分钟。
- 小心弃上清。
- 再离心1分钟,吸弃管中残留液体。
- 加入50μL RNA洗脱液,溶解RNA沉淀,存放于-80℃待用。由于50mL植物油按0.1~0.5pg/mL的浓度计算,最多可提出约5~25pg的RNA,故只能RT-PCR检测回收效果,不能测OD。
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